MagPure A3

MagPure A3 utiliza la tecnología de perlas paramagnéticas de Magen para la purificación de alto rendimiento de amplicones de PCR. Su tampón optimizado permite que los amplicones de PCR de 100 pb o más se unan selectivamente a las perlas paramagnéticas. Los cebadores sobrantes, los nucleótidos, las sales y las enzimas se eliminan mediante un sencillo procedimiento de lavado. El producto de PCR purificado resultante está prácticamente libre de contaminantes.

Especificaciones

Principio

Este producto utiliza partículas magnéticas de alta capacidad de unión para la purificación de ADN. Al mezclar los amplicones de PCR con MagPure A3, los fragmentos de ADN de 100 pb o más se unen a las perlas magnéticas. Los cebadores sobrantes, los nucleótidos, las sales y las enzimas se eliminan mediante un sencillo procedimiento de lavado. Finalmente, el ADN se eluye con tampón de elución o agua.

Ventajas

• Amplia variedad de aplicaciones: productos de ADN, mezclas de digestión enzimática y reacciones de PCR
• Alta recuperación: apto para fragmentos de entre 100 pb y 20 kb
• Alta pureza: elimina eficazmente dNTP, cebadores, dímeros de cebadores, sales y otras impurezas
• Procesamiento flexible: compatible con procedimientos manuales y estaciones de trabajo automatizadas

Validación técnica

MagPure A3 se evaluó mediante ensayos internos de control de calidad para la selección de fragmentos de ADN por tamaño, la recuperación de marcadores de ADN a microescala y la evaluación del fondo de ácidos nucleicos. El lote de A3 XP analizado se comparó con un lote de control estándar utilizando diferentes relaciones entre el volumen de perlas y el de muestra.

En los ensayos de selección por tamaño de marcadores de ADN a macroescala, MagPure A3 mostró patrones de recuperación de fragmentos dependientes de la proporción de perlas, desde 0,6× hasta 1,8×. El análisis mediante electroforesis en gel de agarosa no mostró diferencias evidentes entre el lote evaluado y el lote de control, lo que respalda un comportamiento uniforme de selección por tamaño en las proporciones analizadas.

La recuperación de marcadores de ADN a microescala se evaluó adicionalmente con proporciones de perlas de 0,6×, 0,9×, 1,2× y 1,8×. El lote analizado mostró recuperaciones medias de aproximadamente el 37,9 %, 69,2 %, 82,6 % y 97,0 %, respectivamente. La recuperación con las proporciones de 0,6×, 0,9× y 1,2× fue comparable a la del lote de control. El valor más elevado observado con 1,8× se atribuyó a pequeñas variaciones del volumen de elución bajo la condición de elución de 50 µl.

En la evaluación del fondo de ácidos nucleicos, las mediciones mediante Qubit se situaron por debajo del límite de detección para el lote de perlas A3 XP analizado, lo que indica que no se detectó fondo de ácidos nucleicos en las condiciones evaluadas.

Además, MagPure A3 se comparó con AMPure XP en procedimientos de purificación y selección por tamaño durante la preparación de bibliotecas. En los ensayos de selección de tamaño en dos etapas, realizados con un volumen total de perlas de 1,5×, MagPure A3 mostró un patrón de selección comparable al de AMPure XP utilizando proporciones de primera unión de 0,9×, 0,8×, 0,7× y 0,6×. El análisis mediante electroforesis en gel de agarosa mostró patrones similares de distribución de fragmentos en la primera y la segunda unión con ambos sistemas de perlas en las condiciones evaluadas.

Estos resultados respaldan el uso de MagPure A3 en la purificación de productos de PCR, la purificación de bibliotecas y la selección por tamaño para NGS, en flujos de trabajo que requieren un manejo y un comportamiento de selección por tamaño similares a los de AMPure XP.

Kit Contents

Storage and Stability

MagPure A3 should be stored at 2-8°C upon arrival and is stable up to 18 months under the condition. However, short-term storage (up to 12 weeks) at room temperature (15-25°C) does not affect its performance. Shake the reagent well before use. It should appear homogenous and consistent in color.