MagBind Particles

Las partículas MagBind son perlas magnéticas recubiertas de carboxilo, diseñadas para procedimientos de purificación de ácidos nucleicos basados en la química de unión con PEG/NaCl. A diferencia de las perlas magnéticas de sílice, la adsorción del ADN sobre las partículas MagBind se produce mediante precipitación inducida por exclusión de volumen en condiciones controladas de polietilenglicol, lo que permite recuperar eficazmente ácidos nucleicos en un amplio intervalo de tamaños de fragmento.

Este mecanismo de unión permite su uso en aplicaciones que requieren una recuperación controlada del ADN o la selección de fragmentos por tamaño, como la purificación de reacciones enzimáticas y el enriquecimiento de fragmentos. La estructura no porosa y monodispersa de las partículas favorece una respuesta magnética reproducible y un comportamiento de separación uniforme en diferentes condiciones de muestra.

Las partículas MagBind se integran habitualmente en procedimientos que requieren un procesamiento flexible de ácidos nucleicos, incluidos los sistemas de purificación de ADN/ARN de muestras FFPE y los procesos de purificación basados en PEG, donde una recuperación estable y un comportamiento de unión predecible son esenciales para los análisis moleculares posteriores.

Especificaciones

Principio

Unión mediada por alcohol/PEG 8000: en soluciones que contienen alcohol (aproximadamente un 40 %) o PEG 8000 (>8 %), el ADN/ARN precipita y se adsorbe sobre la superficie de las partículas MagBind, mientras que las proteínas y otras impurezas no quedan adsorbidas. Tras tratar la muestra biológica con una solución de digestión o un tampón de lisis, el ADN/ARN se libera de las células, los orgánulos y los complejos proteicos, como los ribosomas y los nucleosomas. Al añadir las partículas MagBind y la solución de unión, el ADN/ARN se adsorbe sobre la superficie de las partículas y forma complejos de ADN/ARN con las perlas magnéticas. Bajo la acción de un campo magnético, las perlas se separan y se recogen, mientras que las proteínas y otras impurezas se eliminan junto con el sobrenadante. Después de dos o tres etapas adicionales de lavado, los complejos se resuspenden en agua estéril o tampón TE, lo que permite eluir el ADN/ARN de la superficie de las perlas magnéticas y obtener los ácidos nucleicos purificados.

Validación técnica

Las partículas MagBind se evaluaron como perlas magnéticas carboxiladas, esféricas y monodispersas para procedimientos de unión de ácidos nucleicos mediados por alcohol y PEG. Las especificaciones del producto indican una recuperación de ADN/ARN en condiciones de unión mediadas por alcohol y PEG 8000, sin DNasa, RNasa ni ADN residual detectables en las condiciones de control de calidad evaluadas.

La estabilidad a largo plazo a temperatura ambiente se evaluó utilizando varios lotes de partículas MagBind conservados durante uno, dos y tres años. En los ensayos de recuperación de marcadores de ADN a partir de plasma bovino, la mayoría de los lotes evaluados alcanzaron una recuperación aproximada del 80 %, y la electroforesis en gel de agarosa mostró fragmentos de marcadores recuperables durante los distintos periodos de conservación evaluados.

La recuperación funcional de ácidos nucleicos virales también se evaluó utilizando muestras de plasma con VHB. Los distintos lotes de partículas MagBind conservados durante uno a tres años produjeron valores de Ct principalmente comprendidos entre 24,50 y 25,39, con una variación aproximada de 0,5 Ct. En las condiciones evaluadas, estos resultados indican que la conservación a largo plazo a temperatura ambiente no tuvo un efecto negativo evidente sobre la recuperación de ácidos nucleicos del VHB.

Ordering information

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Para consultar una comparación completa de todos los sistemas de perlas magnéticas, consulte la Guía de selección de perlas magnéticas.