Introducción
Las partículas MagPure constituyen el sistema estándar de perlas magnéticas de sílice dentro de la gama de soluciones de preparación de muestras de Magen. Estas partículas están diseñadas para la purificación rutinaria de ADN y ARN a partir de muestras biológicas, incluidos tejidos, sangre y células cultivadas.
El sistema proporciona un comportamiento de adsorción uniforme en condiciones de unión con agentes caotrópicos y es compatible con una amplia variedad de tampones y flujos de trabajo de extracción.
Detalles
Especificaciones
|
Características
|
Especificaciones
|
|
Concentración
|
100 mg/ml
|
|
Aspecto
|
Suspensión de partículas negras
|
|
Grupo funcional de la superficie
|
Si–OH, silanol
|
|
Dispersidad
|
Partículas amorfas polidispersas
|
|
Tamaño de partícula
|
1,5–5 µm
|
|
Condiciones de conservación
|
Estable durante un máximo de 2 años a temperatura ambiente.
Se recomienda conservar a 2–8 °C para evitar el crecimiento microbiano.
|
Tiempo de respuesta magnética
|
15–30 segundos
|
Tiempo de sedimentación
|
>5 minutos
|
Unión mediada por alta concentración de sales
|
>2 M de tiocianato de guanidinio; recuperación de ADN de hasta el 80 %
|
Unión mediada por alcohol
|
Clorhidrato de guanidinio 2 M/isopropanol al 30 %; recuperación de ADN/ARN de hasta el 85 %
|
Unión mediada por PEG 8000
|
Recuperación de ADN/ARN de hasta el 85 %
|
DNasa/RNasa
|
No detectadas
|
ADN residual
|
<1 ppm
|
Aplicaciones recomendadas
|
Extracción de plásmidos, recuperación de ADN a partir de geles, extracción de ADN genómico y extracción de ARN.
|
Principio
Unión mediada por alta concentración de sales: en soluciones que contienen entre 2 y 4 M de tiocianato de guanidinio, las partículas MagPure permiten recuperar selectivamente moléculas de ADN, mientras que impurezas como las proteínas y los polisacáridos no quedan adsorbidas.
Unión mediada por alcohol: en soluciones que contienen sales de guanidinio y alcohol (>25 %), las partículas MagPure permiten recuperar selectivamente moléculas de ADN/ARN, mientras que las proteínas y otras impurezas no quedan adsorbidas.
Después de tratar las muestras biológicas con una solución de digestión o un tampón de lisis, el ADN/ARN se libera de las células, los orgánulos y los complejos proteicos, incluidos los ribosomas y los nucleosomas. Tras añadir las partículas MagPure y la solución de unión, el ADN/ARN se adsorbe sobre la superficie de las partículas MagPure y forma complejos de ADN/ARN con las perlas. Bajo la acción de un campo magnético, las perlas se separan y se recogen, mientras que las proteínas y otras impurezas se eliminan junto con el sobrenadante. Después de dos o tres etapas adicionales de lavado, los complejos de ADN/ARN con las perlas magnéticas se resuspenden en agua estéril o tampón TE. Finalmente, el ADN/ARN se libera de la superficie de las perlas magnéticas para obtener los ácidos nucleicos purificados.
Validación técnica
Las partículas MagPure se evaluaron en varios sistemas de unión de ácidos nucleicos, incluidas condiciones con alta concentración de sales, unión mediada por alcohol y tiocianato de guanidinio. En los ensayos de recuperación de marcadores de ADN, las partículas MagPure mostraron una recuperación estable con diferentes tampones de unión. Las concentraciones del ADN recuperado se situaron aproximadamente entre 24,09 y 33,49 ng/µl en las condiciones evaluadas.
En los ensayos de recuperación de ADN a partir de geles de agarosa, las partículas MagPure proporcionaron una recuperación uniforme tanto en muestras de marcadores preparadas en tampón TE como en muestras incluidas en gel de agarosa al 1,5 %. En comparación con los otros formatos de perlas evaluados, las partículas MagPure mostraron un rendimiento estable en los procedimientos de recuperación de ADN a partir de geles, lo que respalda su uso en la extracción desde geles, la purificación de productos y la limpieza rutinaria de ADN.
Los ensayos de aplicación en la extracción de ADN genómico también mostraron que las partículas MagPure pueden utilizarse en procedimientos de extracción de ADN a partir de sangre, tejidos y suelo. El ADN extraído presentó valores aceptables de A260/280 y A260/230, mientras que la electroforesis en gel de agarosa confirmó la recuperación de bandas de ADN genómico. Estos resultados respaldan su uso como perlas magnéticas de sílice de uso general para la purificación de ácidos nucleicos.
Ordering information
|
CAT.No.
|
Product Name
|
Package
|
C14100
|
MagPure Particles
|
100 ml
|
C14101
|
MagPure Particles
|
400 ml
|
C14102
|
MagPure Particles
|
3 x 400 ml
|
C14103
|
MagPure Particles
|
10 x 400 ml
|
