Introducción
El MagPure Universal RNA Kit (IVD3020) está diseñado para la purificación automatizada de ARN total a partir de tejidos, células cultivadas y muestras celulares procedentes de orina mediante tecnología de purificación con partículas magnéticas. La extracción basada en partículas magnéticas permite una recuperación eficiente del ARN y facilita la automatización de los flujos de trabajo en laboratorios de alto rendimiento.
La química de purificación permite que las moléculas de ARN se unan selectivamente a las partículas magnéticas en condiciones de tampón optimizadas. La separación magnética, combinada con el tratamiento con DNasa I, facilita la eliminación de proteínas, ADN genómico y otros contaminantes durante las etapas de lavado.
Dentro de los sistemas de extracción de ARN de Magen, el MagPure Universal RNA Kit constituye la plataforma de extracción basada en partículas magnéticas para la purificación automatizada de ARN total a partir de muestras biológicas habituales, incluidos tejidos, células cultivadas y sedimentos celulares obtenidos de orina.
Detalles
Flujo de trabajo

Descripción general del flujo de trabajo
MagPure Universal RNA Kit with DNase I emplea un flujo de trabajo basado en perlas magnéticas para purificar ARN total a partir de tejidos, células cultivadas, material vegetal, sedimentos celulares de orina y otras muestras clínicas o biológicas compatibles. Tras la disgregación de la muestra y la lisis con RTL Lysis Buffer, las condiciones de unión del ARN se establecen mediante Buffer MCB y MagPure RNA Particles. El ARN se captura en las partículas magnéticas, se separa mediante manipulación magnética y se purifica mediante etapas de lavado, tratamiento con DNasa I, nueva unión, lavados adicionales, secado y elución en agua libre de RNasas. El flujo de trabajo combina la química de unión del ARN a base de sílice con la manipulación de partículas magnéticas para la extracción manual o automatizada de ARN.
Lógica de procesamiento de las muestras
Este flujo de trabajo está diseñado para tipos de muestra en los que son importantes la manipulación magnética y el control del ADN residual. Los tejidos blandos, las células cultivadas y las muestras vegetales difieren principalmente en las etapas de disgregación y clarificación, mientras que las muestras de orina se centrifugan primero para recoger el material celular antes de la lisis. Una vez que el lisado o el sobrenadante clarificado entra en la etapa de unión magnética, el resto del flujo sigue una secuencia uniforme: unión del ARN a las partículas magnéticas, primer lavado, tratamiento con DNasa I, restablecimiento de las condiciones de unión con Buffer MCB, lavados finales, secado y elución. El flujo de trabajo también admite determinados lisados obtenidos con TRIzol/MagZol, según la vía de preparación de la muestra.
Tiempos y características del flujo de trabajo
En condiciones habituales de procesamiento manual, el flujo de trabajo suele completarse en aproximadamente 85–105 minutos, dependiendo principalmente del pretratamiento de la muestra, la viscosidad del lisado, el tiempo de incubación con DNasa y el tiempo de secado magnético. Para el procesamiento automatizado en sistemas de extracción de 32/48 o 96 canales, el flujo incorpora una pausa programada para añadir Buffer MCB después del tratamiento con DNasa, lo que permite integrar la etapa de digestión del ADN en el proceso magnético automatizado. Esta vía es adecuada para laboratorios que necesitan una extracción magnética de ARN reproducible, con tratamiento integrado con DNasa y compatibilidad con el procesamiento manual o automatizado. Para consultar las condiciones detalladas de cada etapa, las recomendaciones del flujo de trabajo y los tiempos de procesamiento estimados, consulte la Nota sobre el flujo de trabajo en la sección de descargas.
Especificaciones
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Características
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Especificaciones
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Funciones principales
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Aislamiento de ARN total de tejidos, células y orina
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Aplicaciones
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RT-PCR, síntesis de ADNc y secuenciación de nueva generación
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Método de purificación
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Perlas magnéticas polidispersas
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Tecnología de purificación
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Tecnología de perlas magnéticas
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Método de procesamiento
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Manual o automatizado
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Instrumentos compatibles
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Extractor de ácidos nucleicos y estación de pipeteo
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Tipos de muestra
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Tejidos, células, linfocitos y otras muestras clínicas
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Cantidad de muestra
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Células cultivadas en suspensión: 3–5 × 106
Tejido animal: 10–20 mg
Tejido vegetal: ≤100 mg
Orina: ≤10 mL
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Características técnicas
Purificación de ARN con perlas magnéticas
Las moléculas de ARN se unen selectivamente a las partículas magnéticas, lo que permite una purificación eficiente mediante separación magnética.
Flujo de extracción preparado para la automatización
El sistema permite la integración con instrumentos automatizados de extracción de ácidos nucleicos y plataformas de purificación multicanal.
Amplia compatibilidad de muestras
La química de extracción permite purificar ARN a partir de tejidos, células cultivadas y otras muestras biológicas.
Rendimiento de purificación estable
La extracción con perlas magnéticas reduce la variabilidad manual y proporciona una recuperación uniforme del ARN entre múltiples muestras.
Validación técnica
Los experimentos de validación demostraron una purificación estable del ARN en múltiples muestras biológicas procesadas mediante flujos de extracción con perlas magnéticas.
El ARN purificado presentó relaciones de pureza compatibles con ARN de alta calidad, adecuado para RT-PCR y flujos de análisis transcriptómico.
La evaluación comparativa frente a sistemas de purificación de ARN de uso habitual mostró valores comparables de pureza y rendimiento del ARN, lo que respalda un funcionamiento fiable en laboratorios con extracción automatizada de ARN.
Aplicaciones habituales
• Análisis de la expresión génica
• Flujos de trabajo de RT-PCR
• Preparación de muestras para secuenciación de ARN
• Estudios transcriptómicos
• Laboratorios de purificación de ARN de alto rendimiento
Kit Contents
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Contents
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IVD3020
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Purification Times
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200 Preps
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MagPure RNA Particles
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7 ml
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DNase I
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4 x 600 µl
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DNase Buffer
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80 ml
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RTL Lysis Buffer
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150 ml
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Buffer MCB*
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75 ml
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Buffer MW1*
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110 ml
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Buffer MW2*
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50 ml
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RNase Free Water
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60 ml
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Cat.No
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Reagent
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IVD3020-F-96
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DNase Buffer
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60 ml
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DNase I
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2 x 600 μl
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RTL Lysis Buffer
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80 ml
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Buffer MCB
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18 ml
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96-Tip
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1
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Sample plate (DW Plate)
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500μl Buffer MCB
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1
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Wash 1 Plate (DW Plate)
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700μl Buffer MW1
30μl MagPure RNA Partilces
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1
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DNase Plate
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Empty
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Wash 2 Plate (DW Plate)
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700μl Buffer MW1
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1
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Wash 3 Plate (DW Plate)
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900μl Buffer MW2
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1
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Elution plate (DW Plate)
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80μl RNase Free Water
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1
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Cat.No
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Reagent
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IVD3020-TL-06
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Purification times
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96 Preps
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DNase I
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2 x 600 μl
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DNase Buffer
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60 ml
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RTL Lysis Buffer
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60 ml
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Buffer MCB
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40 ml
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96-Tip
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12 PCS
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2.0ml V-bottom plate
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Row 1/7:500μl Buffer MCB
Row 2/8:500μl Buffer MW1
Row 3/9:empty
Row 4/10:30μl Magpure RNA Particles
500μl Buffer MW2
Row 5/11:900μl Buffer MW2
Row 6/12:80μl RNase Free Water
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6
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Storage and Stability
MagPure RNA Particles should be stored at 2–8°C upon arrival. DNase I should be stored at -20°C. However, short-term storage (DNase I up to 1 weeks, MagPure RNA Particles up to 8 weeks) at roomtemperature (15–25°C) does not affect their performance. The remaining kit components can be stored at room temperature (15–25°C) and are stable for at least 18 months under these conditions.