Introduction
MagPure Circulating DNA Maxi Kit (IVD5435) representa la configuración con perlas magnéticas dentro de la gama Magen de ADN circulante. Desarrollado mediante un perfeccionamiento prolongado de la química de las partículas magnéticas, el sistema está diseñado para procesar de forma escalable entradas de plasma de 1–8 ml.
En lugar de centrarse únicamente en declaraciones de rendimiento, el desarrollo priorizó la uniformidad de la superficie de las perlas, la estabilidad de adsorción y la adaptabilidad del flujo de trabajo. La química de extracción es compatible tanto con soportes magnéticos manuales como con sistemas automatizados de manipulación de líquidos.
En la validación interna, los resultados de extracción de plasma mostraron rendimientos reproducibles de cfDNA entre réplicas. Las evaluaciones comparativas bajo condiciones equivalentes indicaron un rendimiento coherente con sistemas magnéticos europeos consolidados. Las pruebas de estabilidad entre lotes de producción no mostraron variaciones medibles en los parámetros fisicoquímicos durante periodos prolongados de almacenamiento.
Los laboratorios que prefieren flujos basados en membrana pueden consultar (HiPure Circulating DNA Kit – IVD3182). Para volúmenes reducidos de plasma o flujos selectivos por tamaño, consulte:
· Extracción magnética de pequeño volumen → (IVD5432)
· Enriquecimiento selectivo por tamaño → (12927)
· Extracción en microcolumna a partir de plasma → (D3180)
IVD5435 constituye el modelo magnético escalable de referencia dentro del sistema.
Details
Flujo de trabajo
Descripción general del flujo de trabajo
MagPure Circulating DNA Maxi Kit utiliza un flujo basado en perlas magnéticas para purificar ADN circulante a partir de plasma y suero. El ADN se captura mediante la interacción partícula-ADN bajo condiciones de mezcla, en lugar de atravesar una membrana, lo que permite manipular de forma flexible volúmenes mayores de muestra y cfDNA de baja abundancia.
Lógica de procesamiento de la muestra
Este flujo admite entradas de 1–8 ml de plasma o suero. Con volúmenes menores, la unión del ADN suele completarse en una sola etapa; las muestras de mayor volumen se procesan mediante una unión escalonada para mantener una recuperación uniforme. La separación magnética sustituye al flujo a través de columna, permite un manejo escalable y es compatible con sistemas automatizados.
Características de tiempo y flujo de trabajo
En comparación con los flujos en columna, el tiempo de procesamiento suele ser mayor debido a la mezcla, la separación magnética y las manipulaciones repetidas de líquidos. En condiciones estándar, el flujo se completa normalmente en aproximadamente 105–130 minutos. Para consultar los pasos detallados, las estrategias de unión y las indicaciones de procesamiento, consulte la Nota de flujo de trabajo en la sección de descargas.
Características de ingeniería
Uniformidad de las partículas magnéticas
Durante la producción se controlan el contenido sólido y la respuesta magnética de las perlas. La evaluación experimental mostró que la concentración de perlas influye directamente en la eficiencia de recuperación, por lo que el flujo final utiliza proporciones optimizadas entre perlas y volumen.
Estabilidad de recuperación en plasma
Durante el procesamiento de 4–8 ml de plasma, las extracciones replicadas mantuvieron concentraciones Qubit estables con desviaciones mínimas, lo que respalda los flujos de mayor volumen.
Estabilidad durante el almacenamiento y entre lotes
Los parámetros fisicoquímicos —pH, densidad y conductividad— y las pruebas de recuperación de marcadores confirmaron un rendimiento uniforme entre varios lotes de producción, incluidos kits almacenados durante un máximo de dos años.
Escalabilidad del flujo de trabajo
IVD5435 se integra en un sistema de extracción más amplio:
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Flujo con membrana y vacío → (IVD3182)
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Kit magnético para pequeños volúmenes → (IVD5432)
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Aislamiento selectivo de fragmentos → (12927)
Validación técnica
Pruebas de recuperación de marcadores
Los experimentos con marcadores añadidos mostraron eficiencias de recuperación de ADN normalmente superiores al 80% en varios lotes de reactivos, lo que confirma la estabilidad de adsorción del sistema de partículas magnéticas.
Rendimiento de extracción de cfDNA plasmático
Los experimentos con muestras de plasma mostraron rendimientos de ADN circulante normalmente de aproximadamente 5–7 ng por ml de plasma al procesar volúmenes de plasma a escala de mililitros.
Evaluación comparativa de la extracción
Bajo condiciones equivalentes, los rendimientos de ADN circulante obtenidos con el sistema MagPure fueron comparables a los de kits en columna para ADN circulante ampliamente utilizados.
Resumen de escenarios de aplicación
La siguiente tabla resume escenarios de investigación publicados en los que se utilizaron IVD5435 o formatos MagPure estrechamente relacionados para preparar cfDNA. Su finalidad es ayudar a comprender las aplicaciones habituales de esta ruta basada en perlas magnéticas antes de consultar las notas técnicas y publicaciones relacionadas.
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Escenario de aplicación
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Formato relacionado
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Muestra/fuente de cfDNA
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Uso posterior en investigación
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NIPT basado en cfDNA de plasma materno para evaluar el riesgo de hidropesía fetal por hemoglobina Bart en parejas portadoras de α-talasemia
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IVD5435
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cfDNA/cffDNA de plasma materno de embarazos en los que ambos progenitores eran portadores de la deleción SEA de α-talasemia
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Secuenciación con captura dirigida y adaptadores UID, estimación de la fracción fetal y clasificación genotípica bayesiana para determinar el estado de la deleción SEA fetal, detectar hidropesía fetal por hemoglobina Bart y realizar simultáneamente cribado de T13/T18/T21
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Diagnóstico prenatal no invasivo basado en cfDNA de plasma materno para el riesgo de complejo de esclerosis tuberosa como trastorno monogénico
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IVD5432
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cfDNA de plasma materno y ADN leucocitario materno emparejado de embarazos con riesgo de TSC
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NGS dirigido de cfDNA de plasma materno y ADN leucocitario para inferir el genotipo fetal de TSC1/TSC2 y evaluar la viabilidad del NIPD
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Ver más escenarios de aplicación
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Escenario de aplicación
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Formato relacionado
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Muestra/fuente de cfDNA
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Uso posterior en investigación
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Fragmentómica de cfDNA de plasma materno para predecir y caracterizar molecularmente la diabetes mellitus gestacional
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IVD5432
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cfDNA longitudinal de plasma materno de mujeres con diabetes gestacional y controles sanos emparejados
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Secuenciación de cfDNA de alta profundidad y análisis integrado de fragmentómica/puntuación TSS para investigar asociaciones con el metabolismo lipídico, evaluar marcadores pancreáticos relacionados con PRSS1 y desarrollar modelos de predicción precoz de diabetes gestacional
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Desarrollo de un ensayo de metilación de cfDNA plasmático para detectar cáncer colorrectal y lesiones precancerosas
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IVD5435
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cfDNA plasmático de participantes con cáncer colorrectal, lesiones precancerosas o sin evidencia de enfermedad
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PCR en tiempo real TaqMan multiplex para detectar metilación de SEPT9/SDC2/ALX4 y evaluar el rendimiento en el cribado de cáncer colorrectal y lesiones precancerosas
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Descubrimiento de biomarcadores de metilación de cfDNA plasmático para la investigación del diagnóstico precoz no invasivo del cáncer de mama
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IVD5435
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cfDNA plasmático de pacientes con cáncer de mama en estadio temprano y controles femeninos sanos
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Secuenciación por bisulfito con captura dirigida y validación mediante BSP-HiSeq para descubrir biomarcadores CpG de metilación de cfDNA asociados al cáncer de mama y evaluar su rendimiento diagnóstico
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Monitorización de cfDNA de Echinococcus granulosus antes y después del tratamiento con albendazol en equinococosis quística
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IVD5432
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cfDNA plasmático de E. granulosus de pacientes con equinococosis quística antes y después del tratamiento con albendazol
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Secuenciación de alto rendimiento para identificar lecturas de cfDNA de E. granulosus, analizar la longitud de los fragmentos, comparar las fuentes genómicas de liberación e investigar la monitorización de la respuesta al tratamiento con albendazol
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Nota: estos ejemplos describen usos publicados seleccionados de IVD5435 o de formatos MagPure de ADN circulante estrechamente relacionados para la preparación previa de cfDNA. El flujo de extracción proporciona ácidos nucleicos purificados para los ensayos posteriores; las conclusiones finales dependen del diseño completo del estudio, del método de secuenciación o detección, del análisis bioinformático y de la estrategia de validación clínica.
Kit Contents
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Contents
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IVD5435
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Purification Times
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50
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MagPure Particles F
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14 ml
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Carrier RNA
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310 μg
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Proteinase K
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240 mg
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Protease Dissolve Buffer
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15 ml
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Buffer SDS
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15 ml
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Buffer MLK
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500 ml
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Buffer MAW1
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250 ml
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Buffer MW2*
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50 ml
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Elution Buffer
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60 ml
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Storage and Stability
Proteinase K, Carrier RNA and MagPure Particles F should be stored at 2–8°C upon arrival. However, short-term storage (up to 12 weeks) at room temperature (15–25°C) does not affect their performance.Theremaining kit components can be stored dry at room temperature (15–25°C) and are stable for at least 18 months under these conditions.The entire kit can be stored at 2–8°C, but in this case buffers should beredissolved before use. Make sure that all buffers are at room temperature when used.
Experiment Data
Purchase Guide
Para seleccionar el sistema de extracción de ADN más adecuado según el tipo de muestra, el volumen de entrada y los requisitos del flujo de trabajo:
👉 Guía de selección de kits Magen
Para consultar una visión técnica más amplia de las rutas de trabajo de cfDNA, la lógica de procesamiento y la orientación de las aplicaciones posteriores:
👉 Flujos de extracción y enriquecimiento de cfDNA
Para revisar la estructura de referencia y la lógica comparativa de procesamiento de flujos representativos de cfDNA y ácidos nucleicos circulantes:
👉 Notas de flujo de trabajo de cfDNA
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IVD3182 — flujo de extracción de cfDNA en columna para entradas rutinarias de 1–5 ml de plasma o suero.
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IVD5435 — flujo de extracción de cfDNA con perlas magnéticas para el procesamiento escalable de grandes volúmenes de plasma o suero.
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12927 — flujo de enriquecimiento de fragmentos para recuperar fracciones cortas de cfDNA y reducir el fondo de fragmentos largos.
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R4316 — flujo en columna para ADN/ARN circulante y ARN/microARN, con captura de gran volumen seguida de concentración en Micro Column.
Notas de aplicación relacionadas con cfDNA: estas notas ayudan a explicar cómo se integra esta ruta de extracción de ADN circulante en distintos flujos de investigación de cfDNA plasmático y en los requisitos de los ensayos posteriores.
👉 Mapa de aplicaciones · Biomarcadores de metilación · cfDNA prenatal
