La extracción de ARN a partir de tejidos y células cultivadas requiere estrategias diferentes según la composición de la muestra, el tipo de ARN y la aplicación posterior. Los tejidos blandos y las células cultivadas suelen procesarse con workflows estándar basados en columnas, mientras que los tejidos fibrosos, ricos en lípidos o difíciles de lisar pueden requerir una química de lisis más intensa. Además, algunas aplicaciones solo requieren ARN de mayor tamaño, mientras que otras necesitan recuperar microARN o reducir de forma más completa el arrastre de ADN genómico.
Magen ofrece una cartera estructurada para la extracción de ARN de tejidos y células, que incluye workflows basados en membrana de sílice, perlas magnéticas y MagZol. Estos sistemas permiten la purificación rutinaria de ARN total, el aislamiento de microARN, el procesamiento de alto rendimiento y la extracción automatizada a partir de una amplia variedad de muestras biológicas.
Esta guía está diseñada para ayudar a laboratorios y distribuidores a seleccionar el workflow de extracción de ARN más adecuado según el tipo de muestra, el ARN objetivo y los requisitos de la aplicación posterior.
Los resultados de la extracción de ARN dependen no solo de la selección de un sistema de extracción adecuado, sino también de una correcta manipulación de la muestra y del control de RNasas durante todo el workflow.
El ARN es muy susceptible a la degradación por RNasas, presentes de forma amplia en el entorno, las superficies de laboratorio y los reactivos. Para obtener resultados fiables, es fundamental utilizar consumibles libres de RNasas, mantener condiciones de trabajo limpias y reducir al mínimo el tiempo de manipulación de la muestra durante la extracción.
Para ARN de baja abundancia, como ARN circulante o microARN, una manipulación cuidadosa es todavía más importante, ya que la degradación o la contaminación pueden afectar de forma significativa al análisis posterior.
- Extracción rutinaria de ARN total a partir de tejido blando o células cultivadas → HiPure ARN total Kit (R4011) | Ver workflow
- Extracción rutinaria de ARN con menor arrastre de ADN genómico → HiPure ARN total Plus Kit (R4111) | Ver workflow
- Aplicaciones de ARN sensibles al ADN → HiPure ARN total Kit (IVD4121) | Ver workflow
- Extracción de ARN de alto rendimiento basada en columnas → HiPure ARN total 96 Kit (R4016)
- Muestras fibrosas, difíciles de lisar o ricas en matriz que requieren lisis inicial con MagZol → HiPure Universal RNA Kit (R4130) | Ver workflow
- Muestras universales difíciles que requieren manejo magnético después de la limpieza con MagZol → MagPure Universal RNA Kit II (R6623) | Ver workflow
- Lisados ricos en proteínas o viscosos en los que se prefiere un workflow magnético directo → MagPure ARN total Kit (R6622) | Ver workflow
- Recuperación de ARN con inclusión o enriquecimiento de miRNA a partir de células / tejidos sin separación de fases → HiPure Cell miRNA Kit (R4311) | Ver workflow
- ARN total incluyendo miRNA, o fracciones separadas de ARN grande y ARN pequeño que requieren lisis inicial con MagZol → HiPure Universal miRNA Kit (R4310) | Ver workflow
- Ruta de ARN total sensible al ADN, incluyendo miRNA → HiPure ARN total Kit (IVD4121) | Ver workflow
- Purificación magnética automatizada estándar de ARN con soporte de DNasa → MagPure Universal RNA Kit (IVD3020) | Ver workflow
- Workflow automatizado continuo sin pausa intermedia → MagPure Universal RNA Kit B (IVD3020B) | Ver workflow
- Workflow magnético con soporte de digestión con Proteinase K → MagPure ARN total Kit (R6622) | Ver workflow
- Limpieza inicial con MagZol seguida de purificación magnética → MagPure Universal RNA Kit II (R6623) | Ver workflow
Nota: Los workflows rutinarios de ARN total suelen estar orientados a ARN de mayor tamaño, salvo que el protocolo esté diseñado específicamente para la recuperación de miRNA o la fraccionación de ARN pequeño. Para estudios de miRNA o ARN pequeño, utilice un workflow validado para la retención o el enriquecimiento de ARN pequeño.
En workflows de extracción de ARN con baja entrada o bajo rendimiento, los valores A260/230 pueden parecer inferiores a lo esperado y no deben utilizarse como único criterio para evaluar el desempeño de la extracción. En la purificación de ARN basada en columnas, la absorbancia de fondo procedente de componentes de tampones caotrópicos puede tener un mayor impacto cuando la concentración de ARN es baja.
Por el contrario, valores A260/230 aparentemente más altos no siempre indican una mejor calidad del ARN. La calidad del ARN debe interpretarse junto con el rendimiento, la integridad y el desempeño en ensayos posteriores, como la transcripción inversa, qRT-PCR o la compatibilidad con secuenciación.
Por este motivo, Magen recomienda evaluar las muestras de ARN según su idoneidad global para el análisis posterior, en lugar de depender únicamente de A260/230, especialmente en muestras de ARN de baja abundancia.
| Producto | Tecnología | Tipo de ARN | Tipos de muestra representativos | Estrategia clave | Uso recomendado |
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HiPure ARN total Kit (R4011) |
Columna de centrifugación | ARN total | Tejidos blandos / células cultivadas / plantas / levaduras / bacterias | Purificación de ARN en una sola columna de sílice | RT-PCR, qPCR y análisis de expresión génica rutinarios a partir de tejidos blandos sencillos, células cultivadas y muestras biológicas estándar |
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HiPure ARN total Plus Kit (R4111) ⭐ |
Doble columna | ARN total |
Tejidos blandos / células cultivadas / plantas |
Columna de eliminación de ADN genómico + columna de ARN | Workflows de RT-PCR, qPCR y expresión de ARN donde se prefiere reducir el arrastre de ADN genómico antes del análisis posterior |
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HiPure ARN total Plus Kit (DNase) (IVD4121) |
Doble columna + DNasa | ARN de mayor tamaño o ARN total incl. miRNA |
Tejidos blandos o ricos en fibras / células cultivadas / pellets celulares derivados de sangre |
Columna de eliminación de ADN genómico + digestión con DNasa + condiciones de unión específicas de la ruta | RT-qPCR sensible al ADN, ensayos moleculares basados en ARN y workflows de expresión génica que requieren un control más intenso del ADN genómico; también adecuado cuando se necesita ARN total incluyendo miRNA |
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HiPure ARN total 96 Kit (R4016) |
Placa de columnas de 96 pocillos |
ARN total |
Células / tejidos / series de muestras de alto rendimiento |
Purificación de alto rendimiento con membrana de sílice | Preparación de ARN de alto rendimiento para estudios de cribado, paneles amplios de muestras, qPCR en placa y workflows de expresión génica a gran escala |
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HiPure Universal RNA Kit (R4130) |
MagZol + columna | ARN total | Muestras animales, vegetales, fúngicas y bacteriasnas / células / tejidos difíciles | MagZol phenol / guanidine lysis + column purification | RNA-seq, qRT-PCR y análisis de transcritos a partir de tejidos difíciles, muestras fibrosas, material vegetal y muestras fúngicas o bacteriasnas que requieren una lisis inicial más intensa con MagZol |
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HiPure Universal miRNA Kit (R4310) ⭐ |
MagZol + columna | ARN total incl. miRNA o ARN grande + miRNA separados |
Tejidos / células cultivadas / muestras difíciles de lisar |
MagZol phenol / guanidine lysis + column purification; fraccionamiento por tamaño controlado mediante alcohol | Perfilado de miRNA, análisis de ARN pequeño, estudios de lncRNA / ARN no codificante y workflows que requieren ARN total incluyendo miRNA o fracciones separadas de ARN grande y ARN pequeño |
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HiPure Cell miRNA Kit (R4311) |
Lisis química + columna | ARN total incl. miRNA / fracción enriquecida en miRNA |
Células cultivadas / tejidos animales / tejidos vegetales |
Recuperación de ARN total incluyendo miRNA o enriquecimiento de miRNA basado en columna, sin separación de fases orgánicas | RT-qPCR de miRNA, análisis de expresión de ARN pequeño y estudios de miRNA en células / tejidos cuando no se prefiere una etapa de separación de fases orgánicas |
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MagPure Universal RNA Kit (IVD3020) ⭐ |
Perlas magnéticas | ARN total |
Tejidos / células cultivadas / plantasas / pellets celulares de orina / muestras seleccionadas de investigación clínica |
Adsorción en partículas magnéticas de sílice + DNasa | Extracción rutinaria automatizada o semiautomatizada de ARN para RT-qPCR, qPCR y workflows estándar de análisis de ARN que requieren manejo magnético con soporte de DNasa |
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MagPure Universal RNA Kit B (IVD3020B) |
Perlas magnéticas | ARN total |
Tejidos de baja entrada / células / pellets de leucocitos de sangre o médula ósea / plantasas |
Sin pausa workflow magnético automatizado + DNasa | Muestras de baja entrada o bajo rendimiento de ARN, de tipo investigación clínica, para RT-qPCR automatizada, preparación para NGS o extracción de ARN estandarizada en placa sin pausa intermedia |
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MagPure ARN total Kit (R6622) |
Perlas magnéticas | ARN total |
Tejidos / células cultivadas / plantasas / levaduras / bacteriass |
Purificación magnética con Proteinase K + DNasa | Extracción magnética automatizada o manual de ARN a partir de lisados de tejido, células, plantasas, levaduras o bacteriass, especialmente cuando el soporte de Proteinase K y DNasa resulta útil para RT-qPCR o análisis de ARN posteriores |
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MagPure Universal RNA Kit II (R6623) |
MagZol + perlas magnéticas | Total RNA incl. miRNA |
Tejido animal / plantasas / sangre o médula ósea / hueso / vasos sanguíneos / hongos / bacteriass |
MagZol lysis + BCP phase separation + magnetic adsorption | Extracción de ARN a partir de muestras universales difíciles para qRT-PCR, análisis de transcritos o workflows orientados a automatización en los que se necesita separación de fases con MagZol antes de la purificación magnética |
Para especificaciones detalladas de producto y descripciones de workflow, consulte las páginas individuales de cada producto.
Una configuración típica de laboratorio para la extracción de ARN de tejidos y células puede establecerse mediante una combinación de:
⭐ R4111 HiPure ARN total Plus Kit para la extracción rutinaria de ARN total con menor contaminación por ADN genómico
⭐ R4310 HiPure Universal miRNA Kit para aplicaciones de microARN y ARN pequeño
⭐ IVD3020 MagPure Universal RNA Kit para workflows automatizados de purificación de ARN
Esta combinación ofrece una cobertura amplia de tipos de muestra habituales y aplicaciones posteriores, manteniendo flexibilidad entre workflows manuales y automatizados.
