Introduction
MagPure Universal DNA Kit (IVD3102) está diseñado para purificar automáticamente ADN genómico de diversas muestras biológicas mediante tecnología de perlas magnéticas. La química de extracción permite recuperar eficazmente el ADN de distintos tipos de muestras, como sangre total, capa leucocitaria, células cultivadas, homogeneizados de tejido y otros materiales biológicos procesados habitualmente en laboratorios de biología molecular.
La purificación con perlas magnéticas permite la unión selectiva de las moléculas de ADN genómico y automatiza las etapas de lavado y elución mediante separación magnética. En comparación con los flujos manuales con columnas, estos sistemas mejoran la consistencia del proceso y permiten la purificación de ácidos nucleicos de alto rendimiento.
MagPure Universal DNA Kit es compatible con instrumentos automatizados de purificación de ácidos nucleicos y permite realizar flujos habituales de extracción de ADN en laboratorios de investigación, laboratorios de biología molecular y entornos de análisis de alto rendimiento.
Dentro de los sistemas de extracción de ADN de Magen, MagPure Universal DNA Kit constituye la plataforma universal de extracción de ADN basada en perlas magnéticas, como complemento de la solución basada en columnas HiPure Universal DNA Kit (D3018) para laboratorios que requieren flujos automatizados de purificación de ADN.
Details
Especificaciones
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Características
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Especificaciones
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Funciones principales
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Aislamiento de ADN total de sangre, capa leucocitaria, tejidos y otras muestras
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Aplicaciones
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Secuenciación de nueva generación, PCR, PCR en tiempo real, etc.
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Método de purificación
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Perlas magnéticas polidispersas
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Tecnología de purificación
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Tecnología de perlas magnéticas
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Método de procesamiento
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Manual o automatizado
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Tipo de muestra
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Sangre anticoagulada, sangre concentrada, capa leucocitaria, linfocitos y células cultivadas
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Cantidad de muestra
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Sangre total: <200 µL; saliva/hisopo: <400 µL; tejido: <20 mg
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Rendimiento
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0.1 - 50μg
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Volumen de elución
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Tiempo por procesamiento
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Características técnicas
Purificación de ADN basada en perlas magnéticas
MagPure Universal DNA Kit utiliza partículas magnéticas de alta capacidad de unión para capturar ADN genómico en condiciones optimizadas. Tras la lisis de la muestra y la digestión con proteasa, el ADN se une a las partículas magnéticas, mientras que las proteínas, las sales y otras impurezas se eliminan mediante lavados sucesivos.
Diseño para el procesamiento universal de muestras
El kit permite extraer ADN genómico de numerosos tipos de muestras biológicas, como sangre, saliva, hisopos, manchas de sangre, semen, tejidos, células cultivadas y materiales derivados de muestras FFPE. Antes del proceso común de purificación con perlas magnéticas se aplican condiciones de lisis específicas para cada muestra, lo que permite procesar distintos tipos de material en un único sistema de extracción.
Flujo optimizado desde la lisis hasta la unión
Las distintas muestras biológicas requieren condiciones específicas de pretratamiento y lisis antes de la unión del ADN. El flujo combina digestión con proteasa, una química de lisis optimizada y adsorción mediante perlas magnéticas para favorecer la liberación y purificación consistentes del ADN a partir de matrices habituales y más complejas.
Formato preparado para automatización
El kit está diseñado para flujos automatizados de purificación con perlas magnéticas y admite formatos de procesamiento de 96 pocillos. Resulta adecuado para laboratorios que necesitan estandarizar la extracción de ADN genómico de distintos tipos de muestras y aumentar el rendimiento de procesamiento.
ADN genómico compatible con aplicaciones posteriores
El ADN genómico purificado es adecuado para aplicaciones habituales de biología molecular, como PCR, qPCR, genotipado, tipificación HLA y preparación de muestras para secuenciación.
Validación técnica
Se realizaron ensayos de validación para evaluar el rendimiento de extracción de ADN de MagPure Universal DNA Kit con tipos representativos de muestras biológicas, incluidas muestras derivadas de sangre, diversos tejidos, tejido de cola de cerdo y saliva. La calidad del ADN se evaluó mediante medición espectrofotométrica, cuantificación por fluorescencia y, cuando correspondía, electroforesis en gel de agarosa.
Validación con muestras derivadas de sangre
El kit se evaluó con muestras derivadas de sangre, incluidas sangre total, manchas de sangre seca y sangre humana coagulada. Para las manchas de sangre seca, la recuperación de ADN se comparó con un flujo comercial de referencia mediante medición de OD, cuantificación con Qubit y electroforesis en gel. Los resultados mostraron una recuperación fiable de ADN a partir de material de sangre seca de baja entrada y destacaron la importancia de la cuantificación por fluorescencia cuando las lecturas de OD pueden sobreestimar la concentración de ADN.
En muestras de sangre coagulada o parcialmente coagulada, la licuefacción optimizada y la purificación con perlas magnéticas mejoraron la consistencia de la extracción. Los datos de validación mostraron valores A260/A280 estables dentro del intervalo esperado para ADN genómico y una mayor estabilidad de A260/A230 con el flujo optimizado. La electroforesis también mostró bandas de ADN genómico más definidas y menor arrastre cuando la muestra coagulada se dispersó suficientemente antes de la extracción.
Validación con muestras de tejido
El kit se evaluó con diversos tejidos, entre ellos oreja, riñón, piel, cola, hígado, bazo, corazón y pulmón de ratón. La electroforesis en gel de agarosa mostró recuperación de ADN genómico en todas las matrices evaluadas, lo que respalda el uso del kit para la extracción habitual de ADN de tejidos tras una lisis y digestión con proteasa adecuadas.
Validación con tejido de cola de cerdo
Se realizó una prueba de extracción de 96 muestras de tejido de cola de cerdo mediante un flujo automatizado con perlas magnéticas. La mayoría de las muestras produjo ADN genómico cuantificable con valores A260/A280 dentro del intervalo esperado, lo que respalda el uso del kit en el genotipado habitual de tejidos animales y en flujos de extracción de alto rendimiento.
Validación con muestras de saliva
Se evaluaron muestras de saliva frescas y almacenadas para determinar el rendimiento con muestras biológicas no invasivas. Los datos de extracción de 96 muestras mostraron una recuperación consistente de ADN en la mayoría de los casos, con valores de pureza adecuados para análisis moleculares posteriores habituales.
En conjunto, los datos experimentales respaldan el uso de MagPure Universal DNA Kit como sistema automatizado de extracción de ADN genómico con perlas magnéticas para los tipos de muestras validados, incluidas muestras derivadas de sangre, tejidos, tejido de cola de cerdo y saliva.
Aplicaciones habituales
El ADN genómico purificado con MagPure Universal DNA Kit es adecuado para flujos habituales de biología molecular y análisis genómico, entre ellos:
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Amplificación por PCR y qPCR
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Análisis de genotipado
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Estudios de tipificación HLA
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Genotipado de tejidos animales
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Flujos de extracción de ADN de sangre, saliva y manchas de sangre seca
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Preparación de muestras para secuenciación
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Extracción automatizada de ADN genómico de alto rendimiento
Productos relacionados
Los laboratorios que extraen ácidos nucleicos de diversas muestras biológicas suelen combinar la purificación automatizada de ADN con otros sistemas de extracción de ADN y ARN.
• HiPure Universal DNA Kit (D3018) – purificación de ADN genómico mediante columnas a partir de muestras biológicas diversas, como sangre, tejidos, hisopos y líquidos corporales
• HiPure Blood DNA Mini Kit (D3111) – purificación de ADN genómico de muestras de sangre total mediante columnas de centrifugación con membrana de sílice
• MagPure Forensic DNA Kit (D6359D) – purificación de ADN en trazas con perlas magnéticas a partir de muestras forenses, como raíces de cabello, manchas de sangre y fragmentos óseos
• MagPure Universal RNA Kit (IVD3020) – purificación automatizada de ARN total de tejidos y células cultivadas
• HiPure Total RNA Plus Kit (R4111) – purificación mediante columnas de ARN total de alta pureza con eliminación de ADN genómico
Kit Contents
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Contents
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IVD3102
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Purification Times
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200
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MagPure Particles
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5 ml
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Proteinase K
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100 mg
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Protease Dissolve Buffer
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10 ml
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Rnase A
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40 mg
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Buffer ATL
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60 ml
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Buffer AL
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60 ml
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Buffer BD*
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20 ml
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Buffer BW1*
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110 ml
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Elution Buffer
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30 ml
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Cat.No
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Reagent
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IVD3102-F-96
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Proteinase K
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50 mg
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Protease Dissolve Buffer
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6 ml
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RNase A
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20 mg
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Buffer ATL
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30 ml
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Buffer AL
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30 ml
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96-Tip
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1
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Sample plate (DW Plate)
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450µl Buffer BD(Ethanol Added)
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1
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Wash 1 Plate (DW Plate)
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600µl Buffer BW1(Ethanol Added)
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1
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Wash 2 Plate (DW Plate)
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600µl Buffer BW1(Ethanol Added)
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1
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Wash 3 Plate (DW Plate)
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750µl Buffer GW2, 20µl MagPure Particle
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1
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Elution plate (DW Plate)
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80µl Elution Buffer
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1
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Cat.No
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Reagent
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IVD3102-TL-06
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Proteinase K
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50 mg
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RNase A
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20 mg
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Protease Dissolve Buffer
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|
6 ml
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Buffer ATL
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40 ml
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Buffer AL
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|
40 ml
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AS-Tip
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12
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2.0ml V-bottom plate
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Row 1/7:450µl Buffer BD
Row 2/8:450µl Buffer BW1
Row 3/9:450µl Buffer BW1
Row 4/10:20μl Magpure Particle
450μl Wash Buffer GW2
Row 5/11:450μl Wash Buffer GW2
Row 6/12:80µl Elution Buffer
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6
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Storage and Stability
Proteinase K, RNase A, MagPure Particles should be stored at 2-8°C upon arrival. However, short-term storage (up to 24 weeks) at room temperature (15-25°C) does not affect their performance. The remaining kit components can be stored at room temperature (15-25°C) and are stable for at least 18 months under these conditions.
Experiment Data
